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　　標(biāo)記原料的發(fā)展

　　隨著材料學(xué)的發(fā)展，各種標(biāo)記物相繼出現(xiàn)，目前，常見(jiàn)的標(biāo)記物有膠體金、彩色微球、熒光微球、時(shí)間分辨熒光微球、磁性微球及量子點(diǎn)，實(shí)現(xiàn)了免疫層析定性至定量檢測(cè)的轉(zhuǎn)變，并進(jìn)一步提高了免疫層析試紙的靈敏度、特異性。接下來(lái)，為大家做一下盤點(diǎn)!

　　01　　膠體金標(biāo)記

　　優(yōu)點(diǎn)：幾乎可以標(biāo)記所有的蛋白分子，使用方便，成本低;檢測(cè)結(jié)果直觀，肉眼可觀察，不需要特殊的儀器設(shè)備。

　　缺點(diǎn)：膠體金產(chǎn)品批間差異較大，靈敏度低;采用物理吸附的方法結(jié)合，抗原/抗體容易從金顆粒表面脫離，標(biāo)記物不穩(wěn)定;只能給出定性或者半定量結(jié)果。

　　02　　彩色微球標(biāo)記

　　優(yōu)點(diǎn)：色彩鮮艷而豐富，彩虹系列色彩均可調(diào)整，可實(shí)現(xiàn)多重檢測(cè);粒度均一、單分散性好、檢測(cè)結(jié)果可重復(fù)性強(qiáng);檢測(cè)結(jié)果直觀，肉眼可觀察，使用方便;與免疫層析用膠體金相比，靈敏度更高。

　　缺點(diǎn)：只能給出定性或者半定量結(jié)果。

　　03　　熒光微球標(biāo)記

　　優(yōu)點(diǎn)：熒光微球具有相對(duì)穩(wěn)定的形態(tài)結(jié)構(gòu)，粒度均一、單分散性好、偶聯(lián)效率高、發(fā)光效率高;可進(jìn)行定量檢測(cè)且檢測(cè)結(jié)果重復(fù)性好;有較好的生物相容性且基本不受外界環(huán)境變化的影響。

　　缺點(diǎn)：熒光微球的價(jià)格略高于彩色微球的價(jià)格。

　　04　　時(shí)間分辨熒光微球標(biāo)記

　　時(shí)間分辨熒光微球內(nèi)部包埋稀土-鑭系元素(如Eu3+、Tb3+、Sm3+、Dy3+)，鑭系元素螯合物在紫外光源的激發(fā)下能發(fā)射特殊的熒光。時(shí)間分辨熒光免疫層析技術(shù)(TRFIA)是以微球作為標(biāo)記物，標(biāo)記抗原、抗體等物質(zhì)，利用時(shí)間分辨熒光分析儀，確定待測(cè)抗原、抗體的量。

　　TRFIA與化學(xué)發(fā)光、電化學(xué)發(fā)光免疫檢測(cè)技術(shù)并稱為三大超靈敏檢測(cè)技術(shù)，在食品檢測(cè)、醫(yī)學(xué)臨床檢測(cè)、生物學(xué)科研檢測(cè)以及環(huán)境檢測(cè)等方面有較為廣泛的應(yīng)用。

　　優(yōu)點(diǎn)：與普通熒光相比，具有Stocks位移大，熒光壽命長(zhǎng)等特點(diǎn)，可以有效避免樣品中的本底熒光，以及激發(fā)光等雜散光的影響，因此相比普通熒光具有更高的靈敏度和抗干擾能力。

　　缺點(diǎn)：儀器設(shè)備要求和成本相對(duì)較高。

　　05　　磁性微球標(biāo)記

　　優(yōu)點(diǎn)：傳統(tǒng)的試紙檢測(cè)時(shí)，最多只能檢測(cè)膜表面10um以內(nèi)的信號(hào)，而膜的厚度通常有幾百微米，因此90%以上的標(biāo)記物難以被有效檢測(cè)到。而利用磁場(chǎng)測(cè)定儀則可以測(cè)定到層析膜上包括膜表面和不能被光學(xué)儀器有效檢測(cè)到的膜深層的順磁顆粒信號(hào)，靈敏度得到提高。待測(cè)物和免疫層析試紙條中除磁性微球外的材料基本上不含有磁性物質(zhì)，本底干擾和其它干擾非常小，有利于提高檢測(cè)的正確性和可重復(fù)性。

　　缺點(diǎn)：利用磁性微球標(biāo)記建立的快速檢測(cè)技術(shù)需要用外界磁場(chǎng)，較為麻煩。

　　06　　量子點(diǎn)標(biāo)記

　　優(yōu)點(diǎn)：熒光強(qiáng)度高，抗漂白能力強(qiáng);發(fā)光顏色多樣;可以減弱甚至消除背景熒光的干擾，量子點(diǎn)波普范圍寬，單一波長(zhǎng)激發(fā)光、一個(gè)波段的光譜或整個(gè)激發(fā)光源均可激發(fā)量子點(diǎn)，使其在整個(gè)可見(jiàn)區(qū)域產(chǎn)生一個(gè)波普比較窄的熒光。

　　缺點(diǎn)：量子點(diǎn)和某些蛋白質(zhì)結(jié)合后可能導(dǎo)致量子點(diǎn)的熒光減弱或淬滅，并且檢測(cè)時(shí)需要用紫外光作為激發(fā)光，操作程序稍顯復(fù)雜，儀器設(shè)備要求和成本都較高。

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